BIAcore产品选择及常见问题汇总
01仪器篇
目前市面上大家在用的仪器可以分为两类:1、使用Classic芯片的仪器:BIAcore、BIAcoreX、BIAcoreXPLUS、BIAcoreX以上型号的仪器需要搭配Classic系列传感芯片。
2、使用SeriesS芯片的仪器:BIAcore8K、BIAcoreS、BIAcoreT/T、BIAcore/A、BIAcoreS51以上型号的仪器需要搭配S系列SeriesS传感芯片。大家在查找芯片的时候,需要先确认下自己要使用的仪器型号哦。
02芯片篇
BIAcore芯片种类非常多,要怎么选择呢?
怎么长的都差不多啊?这怎么选?Duang~daung~duang直接上干货了~别看内容多,但是其实我们平时常用的主要是以下几个:CM5:适用于蛋白质样品CM7:适用于小分子样品(偶联量是CM5的3倍,大分子/小分子分子量比>时必选)SA/NA:适用于生物素标记的样品(应用链霉亲和素和生物素结合原理,不可逆;需要可逆请选择BiotinCAPture捕获试剂盒)NTA:适合带HIS标签的样品(需配合购买NTA试剂盒,货号)ProteinA/G:即用型,适用于抗体维护芯片:Biacore待机状态使用维护芯片,针对于仪器脱盐,除菌等仪器维护工作
我们的芯片都是有一片装、三片装和十片装可以单独购买。
03试剂(盒)篇
一、偶联试剂盒1、氨基偶联试剂盒:适用于偶联含有氨基的配体,可以使用50次以上(货号BR050)2、巯基偶联试剂盒:适用于偶联含有巯基的配体,可以偶联50次以上(货号BR0557)3、醋酸钠:搭配偶联试剂盒使用,偶联缓冲溶液(PH4.0/4.5/5.0/5.5)
二、捕获试剂盒1、HIS捕获试剂盒:捕获含有His标签的融合蛋白(货号)2、GST捕获试剂盒:捕获含有GST标签的融合蛋白(货号BR223)3、Biotin捕获试剂盒:搭配特殊的CAP传感芯片(包含在试剂盒中),可以实现生物素化配体的可逆捕获。(Classic系列货号,S系列货号)3、鼠抗捕获试剂盒:捕获鼠抗IgG抗体(货号BR838)4、人抗捕获试剂盒:捕获人抗IgG抗体(货号BR839)5、人Fab片段捕获试剂盒:捕获人源Fab片段(货号)
三、再生试剂盐酸甘氨酸:用于芯片再生,包含不同PH(PH1.5/2.0/2.5/3.0)
四、维护试剂盒对仪器进行清洗维护(适用BIAcore8K货号,适用BIAcoreT,S货号,适用BIAcoreX,货号,适用BIAcoreC货号)
五、缓冲试剂1、HBS-EP+10x(货号:BR669)成分:0.1MHEPESpH7.4,1.5MNaCl,30mMEDTA,0.5%(v/v)SurfactantP、HBS-P+10x(货号:BR671)成分:0.1MHEPESpH7.4,1.5MNaCl,0.5%(v/v)Surfactant3、HBS-N+10x(货号:BR670)成分:0.1MHEPESpH7.4,1.5MNaCl(区别在于有无EDTA和SurfactantP20,HBS-EP+x10最常用)PBS10x(货号:BR672)成分:0.1M磷酸盐,27mMKCl,1.37MNaClPBS-P10x(货号:)成分:0.2M磷酸盐,27mMKcl,1.37MNacl,0.5%表面活性剂P20(区别在于有无SurfactantP20)
04BIAcore常见问题汇总
1、BIAcore实验相关试剂可以自己配吗?答:不建议自己配制。可能因为过滤不好或者PH不准的原因而影响实验结果。特别是不同PH的醋酸钠和盐酸甘氨酸,不建议自己配制,可能配的PH不准。如果您自己配制试剂,需要预先过滤和超声除气泡。
2、BIAcore芯片是否能重复使用?答:CM5芯片是可以重复使用的。其他芯片根据情况。偶联在芯片上的蛋白A是不能去掉的,样品蛋白B是可以脱离芯片的(再生的过程)。理论上芯片都是可以反复再生的,但是具体多少次和配体蛋白也有关系。
3、BIAcore芯片使用过后怎么保存?答:1.干法保存(将芯片塞进50ml离心管,密闭后直接存于4度)2.半湿法保存(芯片金膜条从卡槽推出,在金膜凹槽内滴加20~50ul运行缓冲液,保证金膜浸润,随后插回芯片卡槽,存于4度,仅限一周;可重复滴加运行缓冲液,避免金膜表面干涸,延长保存时间)3.湿法保存(将芯片塞进50ml离心管,往离心管里加入适量运行缓冲液,确保离心管平放时缓冲液没过金膜;长时间存于4度)PS:已固定配体的芯片的保存时间,取决于配体活性的保存条件和保持时间4、芯片可以偶联几种样品?答案:由机型通道和实验目的决定;BiacoreT/T/S/:4通道,最多偶联3种不同样品;BiacoreX/XPlus:2通道,最多偶联1种样品;Biacore8K16通道,最多偶联8种不同样品;
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