PRP治疗OA和运动损伤,真的浓度越高效
骨关节炎（OA）是一种慢性的退行性关节疾病，患病率高、花费高，是导致世界残疾的第四大原因。年龄、性别、遗传、过度运动、职业、体重等各种因素被认为可以诱发或加重OA的进展。OA病理特点多样，包括关节软骨变形破坏、软骨下骨硬化或囊性变、滑膜病变、韧带松弛、肌肉萎缩等。临床上OA的治疗方法多样，如药物、传统中医、手术治疗等，但不能逆转或治愈，近年来，富血小板血浆（PRP）疗法对于OA的治疗在临床上广泛应用开来，并且取得了令人满意的效果。
富血小板血浆（PRP）是来通过离心的方法从自体血液中制备的血小板血浆的浓缩物。PRP中富含多种生长因子，如血小板衍生生长因子（PDGF）、转化生长因子（TGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、表皮生长因子（EGF）、纤维细胞生长因子（FGF）、类胰岛素生长因子（IGF），这些生长因子被激活后可以加速基质干细胞的分化，促进成骨细胞和成纤维细胞的增殖，加快纤维蛋白与细胞外基质的合成，有利于组织的再生和修复。PRP在临床上对于骨关节炎、各类运动损伤性疾病的治疗的也取得了比较令人满宜的效果。
但是目前市面上的PRP制备装置存在多样化，制备出来的PRP的血小板浓度、白细胞含量存在较大差异，不同制备装置制备的PRP的临床效果也存在差别。那么对于OA和运动损伤的治疗，选择的PRP中血小板的浓度究竟是越高越好，还是适宜最好，我们一起来探究一下吧。
血小板浓度存在最大获益阈值，在一定血小板浓度范围之内，随着血小板浓度的增加，细胞增殖是增加的，超过阈值，血小板浓度继续增加反而会抑制细胞增殖。
1.1一项细胞试验证明，采用1%和5%的PRP处理牙成骨细胞，培养48小时后，进行细胞计数，可以发现添加1%和5%的PRP可使成骨细胞生长显著增加（p0.05），且5%PRP与1%PRP处理的细胞相比，细胞增殖进一步增加，由此也可以看出，随着血小板浓度的增加，对于细胞增殖的促进作用是增加的。
1.2在另一项体外试验中，Augustus等人采用三种不同的PRP分离方法，获得含低浓度的血小板和低浓度白细胞（PRPLR）、高浓度血小板和高浓度白细胞（PRPHP）、高浓度血小板和低浓度白细胞（PRPDS）三种PRP制剂，并将这三种PRP制剂、对照培养基（2%胎牛血清（FBS）和10%FBS）、天然血液作用于人骨、肌肉和肌腱细胞培养物中，采用放射性胸苷试验检查细胞增殖的结果，评估不同PRP制剂对于细胞增殖作用的改善情况。
结果显示，在细胞增殖方面，与对照组相比，加入PRPLP可以显著增加骨细胞、肌细胞和肌腱细胞的细胞增殖（P0.05）。与PRPHP和PRPDS组相比，PRPLP组对于肌细胞和肌腱细胞的细胞增殖作用改善更强。
试验结果可以看出，血小板浓度的增高，对于细胞的增殖作用并未显示出很好的优势，反而会抑制细胞的增殖，低浓度的血小板和低浓度白细胞的PRP显示出较好的促进细胞增殖的作用，因此对于PRP而言，在适宜血小板浓度范围内，白细胞的含量越低治疗效果反而会更好。
低浓度PRP对ACL重建修复的效果并不差
一项动物试验对双侧膝盖行缝合修补术，然后将3×PRP、5×PRP分别注射于两侧膝盖，愈合13周后，测量膝关节松弛度和ACL的结构特性。结果发现与应用5×PRP的膝关节相比，应用3×PRP浓度侧的膝关节修复组织的细胞密度下降24.1%(P0.05)，但结构特性并未显著下降，应用3×PRP浓度侧的膝盖也没有显著改变30°和90°屈曲时的平均前后膝关节松弛度。由此可以看出，与高浓度血小板的PRP相比，低血小板浓度的PRP并未影响ACL重建，同样具有很好的修复效果。
另外，相较于血小板浓度较高的5×PRP，获得低浓度的PRP需要的血液量相对较少，在临床应用过程中患者更易于接受。
低浓度（1×，3×）的血小板对ACL成纤维细胞的增殖、预防凋亡和促进I型和III型前胶原的表达有较好的效果，以1×PRP效果最好。
体外试验制备贫血小板的血浆（PPP），将血小板颗粒重悬于PPP中，分别制备血小板浓度与全血一样（1×PRP）、全血的3倍（3×PRP）、全血的5倍（5×PRP）的血浆制剂。所有样本中的白细胞浓度均≤0.03×细胞/mL，红细胞浓度均≤0.01×细胞/mL。从外植体培养中获得ACL成纤维细胞，并悬浮在PPP、1×PRP、3×PRP、5×PRP或磷酸盐缓冲盐水（PBS）中培养。检测细胞代谢（MTT法）、凋亡（TUNEL法）以及I型和III型前胶原表达。
结果显示：1×PRP在细胞代谢活性、凋亡预防、I型和III型前胶原表达方面均显著优于5×PRP；在细胞代谢活性方面，1×PRP组显著优于PBS组、3×PRP组和5×PRP组；在凋亡预防方面，1×PRP和3×PRP组的细胞凋亡率最低，1×PRP组细胞凋亡率显著低于PBS组、PPP组和5×PRP组；在I型前胶原表达方面，1×PRP组最高，显著高于PBS、PPP、3×PRP和5×PRP组；在III型前胶原表达方面，1×PRP组最高，显著高于PBS、PPP、3×PRP和5×PRP组。
结果不难看出血小板浓度对ACL成纤维细胞的行为是有显著影响的，低浓度（1×，3×）的血小板对ACL成纤维细胞的增殖、预防凋亡和促进I型和III型前胶原的表达有较好的效果，尤其以1×PRP效果最好。
通过以上研究我们可以看出，PRP中所含的血小板并不是完全随着浓度的升高治疗效果也随之增加的，而是在一定的浓度范围之内，效果随着血小板浓度的增加而增加，达到一定的浓度剂量之后，随着血小板的浓度升高反而会对细胞的增殖起到抑制作用，并且制备高浓度血小板的PRP需要的血液量较大，对于患者来说也是一种伤害，而对于骨关节炎和运动损伤的患者来说，适合的才是最好的，采用低浓度血小板的PRP可获得更优的治疗效果。
参考文献：
1.邓程远,等.膝骨关节炎的物理治疗进展中国老年学杂志,8(41):-
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MastrangeloAN,VavkenP,FlemingBC,etal.ReducedplateletconcentrationdoesnotharmPRPeffectivenessforACLrepairinaporcineinvivomodel.JOrthopRes.;29(7):-.
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