艾美捷M199细胞培养基的用途和使用说明

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年,摩根、莫顿和帕克描述了第一个完全定义的媒介之一,它在很大程度上不依赖动物产品或提取物作为营养来源。该培养基支持原代鸡胚心脏细胞的生长。自那以后,它被称为培养基。

艾美捷M细胞培养基目前的用途是在病毒和疫苗生产中添加血清,以及培养许多非转化细胞。它也与不太复杂的介质结合使用。用厄尔平衡盐修饰的培养基设计用于在环境(非CO2)大气条件下保持的细胞。M与原始配方的不同之处在于包含所有L-氨基酸。原始配方含有10种DL氨基酸,以每克计,其生物活性低于相应的L-氨基酸。

寻找一种替代血清的合成培养基来维持体外细胞的研究始于19世纪末,并一直持续至今。Ringer、Locks和Tyrode用添加了葡萄糖的生理盐水代替血清,从而为定义培养基的开发奠定了基础。随着生化和分析技术的改进,血清中的维生素、激素和氨基酸等更多成分已被鉴定并纳入生理盐溶液中,从而降低并在某些情况下消除了作为介质补充所需的动物血清浓度。尽管在生产完全限定的培养基方面对原始配方进行了许多修改,但盐溶液在组织培养中仍然发挥着重要作用。盐溶液的基本功能是维持培养基中的pH值和渗透平衡,为细胞提供水和必需的无机离子,这在今天和一个世纪前首次开发时一样有价值。

厄尔平衡盐的选择受以下因素的强烈影响:

1.细胞类型,

2.单层培养的类型,悬浮液,克隆,以及

3.化学定义的必要程度。回顾有关特定细胞系所需培养基、补充物和生理参数的建议的文献很重要。

艾美捷M细胞培养基每升说明:

将9.4g溶解在-mlddH2O中,轻轻搅拌直至完全溶解。如果需要,添加0.35g碳酸氢钠。将培养基的pH值调整至所需水平。添加额外的水,使溶液达到1L。使用0.22微米膜过滤器进行过滤消毒。等分到无菌容器中。不要高压釜。含有不稳定的化合物,可能会因高压灭菌而损坏。

储存和稳定性:

在室温下储存粉状介质。可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子,并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C,并在短时间内使用。

注:仅供研究使用,不得用于人类、治疗或诊断应用。

艾美捷M细胞培养基文献参考:

1.Morgan,J.F.,Morton,H.J.andParker,R.C.Proc.Soc.Exp.Biol.Med.73:1-8().2.Morgan,J.F.,Campbell,E.andMorton,H.J.J.N.C.I.16:2,-()



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